记得刚到博奥的时候，真的觉得自己找到了宝贝，这么好的一份工作，自己能找到真的是运气，当然也相信自己能做好，也就是在北京环境这么好的国企也很少了，满心的欢喜，带着激情一天天的工作，值得一提的是我在博奥学东西特别快，原因很简单工作心情好，周围同事都会很细心的给你介绍每样设备的使用方法，注意事项（那种感觉回到了高中，好像他们是周围不停溜达的老师，而我在上自习不懂不会的恰巧老师都在），上班时间短，也比较轻

阳性对照品配制： ①物料领取：2.16×10（7次方） 拷贝/ul 大肠埃希氏菌基因组DNA 10.65 ul （一般生产区域物料——不得带入10万级洁净区）、1×TE溶液 44754 ul（100ml/瓶）、5ml离心管1个、50ml离心管1个、移液管25ml一支。 ②配置准备：将基因组DNA以及TE溶液均震荡10次以上，并将分别将5ml、50ml离心管安放至对应管架上。 ③基因组DNA稀释：先添加2289ulTE溶液至5ml离心管中，再将10.65ml基因组DNA添加至其中制得浓度为1×10（6次方）拷贝/ul的基因组DNA（不用震荡）

1.找库管领料:琼脂糖干粉(记录批号) 2.准备配制所需:琼脂糖、250ml玻璃瓶、钥匙、100ml量筒、超净工作台、称量纸、秤量百分位天平、涡旋振荡器、水浴箱、灭菌锅 3.在超净工作台上将称量纸双向对折后，放至天平上并校零、用钥匙秤量0.2g琼脂糖干粉，加入玻璃瓶中，然后量筒量取200ml超纯水(清场)，然后振荡至少10次，然后放置水浴锅中85℃一个小时，灭菌121℃ 20min，入库。

恒温扩增试剂（批号：试20150818）： ①物料领取：50mg/ml BSA、20×EvaGreen、UNG酶、5M Betaine、400mM Mg2SO4、8U/ul Bst DNA聚合酶、10×thermopol buffer、100mM dATP、dUTP、dGTP、dCTP、dTTP。 ②解冻：经手温或者室温解冻后除10×thermopol buffer外其余液体均震荡10次瞬离，完成后将液体整齐有序（按照添加顺序）摆放在蓝板与离心管架上，取0.2ml离心管放置于小黄板上，取1.5ml离心管放置于蓝板上。 ③UNG酶稀释（双人操作：复核人确认添加物料正确并传递给操作人，操作人调枪

空气过滤器灭菌： 1.关闭 空气进样阀，由远及近打开蒸汽进样阀，打开所有小排； 2.调节小排至压力至0.12mpa，灭菌30min； 3.由近及远关闭蒸汽进样阀，并同时打开空气进样阀保证空气过滤器压力在0.05mpa以上； 4.调节小排，保持压力0.15mpa以上吹干过滤器8h以上。

10.22 19:00 种子罐2级30h 转种发酵至 5#罐（3级发酵） 方案：平行发酵 1（3级）+2（4级） 2=1（分析纯乳酸）+1（食品级乳酸） 灭酸：先检查空气过滤器是否可以使用，加入1.5L去离子水，初次灭菌122℃，30min，然后用量筒加酸1.5L，再次灭菌122℃，40min，注意灭酸过程需要提前将盖子拧松防止液体喷涌，灭完后打开灭菌锅立即拧紧防止染菌。 灭油：先检查空气过滤器是否可以使用，然后加入0.6/1L，初次灭菌122℃，30min，再次灭菌122℃，40min，注意灭油过程需

10.19 8:00取样210h 16:00取样218h 今天上午10点左右，出现102罐葡萄糖反料，查明原因当时空气压力仅0.141mpa，而罐压为0.143mpa，所以以后作为补料罐，应当保持压力大于发酵罐而小于空气压力减0.010左右，即0.13mpa，保证不因为压差变化而反料！

甜菜碱配制（5M Betaine） ①暂存间领料：甜菜碱干粉（100g/瓶）、0.22mm一次性过滤头2个（多领1个备用，防止滤头堵塞，过滤无法进行）、无菌水1瓶、注射器100ml1个、50ml离心管2个（需要单独记录批号）。 ②准备工作：2个离心管上分别贴标签标明甜菜碱 I、甜菜碱 II，离心管盖也需要标明I、II；利用电子天平（精确到百分位即可）准确称量27.03g甜菜碱干粉（可分两次称取，若一次称取需要先用药匙添加至离心管I 内6次后对着称量纸倒入离心管I，保持药

离心机镇楼： ①实验室内高低速离心机划分是以转速为标准，其中规定rpm≥10000r/min为高速离心机，rpm≤10000r/min为低速离心机，而低速离心机一般rpm≤5000r/min。 ②离心机分为水平转子和角转子两种，因此离心后取上清液应该注意枪头入液位置，离心样品取出前应标记离心上下方向，确保取液正确。

芯片冲压工序改进： ①冲压工作日早班会后带六角一套以及塞尺一把，进入操作间对冲床检查并保证能够正常使用，操作步骤依次为接通电源——打开气阀（上托升起）——检查并保证上托禁锢——取下硅胶垫——调节模式为自动状态并排尽冲床内气压（上托下落）——双人操作：一人全力压住上托上端，一人使用塞尺0.04mm检查并调整缝隙≤0.04mm即可使用，调整冲压参数为0.7Mpa、60s待用。 ②芯片真空封装后，放置于地门并贴签标记该轮芯片印制总数

物料的领取与退库 ①提前通知库管生产所需物料，填写领料单并核对物料； ②进入车间按照生产指令携带领料单到库管处领取物料（试剂与部分容器存于洁净区暂存间，耗材与大型物料存于一般生产区仓库），并附带便利贴抄取物料批号以及有效期； ③领料退料指定人选，负责领料与退料（退料前检查生产涉及区域是否残留物料），清算余料并更改记录物料余量； ④退库是通知库管第二日生产所需物料信息。

14种混合引物代码： 2—Spn——肺炎链球菌 3—Sau——金黄色葡萄球菌 5—mecA——耐甲氧西林葡萄球菌 6—Eco——大肠杆菌 8—kPn——肺炎克雷伯菌 9—Pae——铜绿假单细胞菌 11—Aba——胞漫不动杆菌 12—IC——阳性内对照 14—Sma——嗜麦芽窄食单胞菌 15—Hin——流感嗜血杆菌 17—Lpn——嗜肺军团菌 18—Mtb——结核分枝杆菌复合群 20—Mpn——肺支原体 21—Cpn——肺炎衣原体 23—PC——阳性外对照

成品组装 1.物料确认 ①打印成品外签：成品盒数+1 枚（4号）。 ②洁净区领取物料：阳性与恒温扩增试剂、质检合格芯片。 ③一般生产区领取物料：包装外盒、6号内衬（上下托）、说明书（包含合格证）、封口签。 ④核对物料：合格芯片每一批次的数量2人核对相同后记数；外盒、内衬、说明书、封口签、、封口膜阳性以及恒温扩增试剂均为成品组盒数。 2.组装 ①叠盒子：先将领取的折叠盒子，折叠成盒（有明显非正常折痕的剔除）； ②上内衬下托

RPD成品标签种类以及数量 半成品 规格 打印方式 数量 RPA芯片 7.5*4.0 传送式 实际合格芯片数 恒温扩增试剂 4.0*1.5 反射式 试剂盒数+1 阳性对照品 4.0*1.5 反射式 试剂盒数+1 封口膜 7.5*4.0 传送式 试剂盒数+1 RPD外签 10*6.5 传送式 试剂盒数+1 其中标签的批号都是对应组分的批号。

以前人们在四月开始收获 躺在高高的谷堆上面笑着 我穿过金黄的麦田 去个稻草人唱歌 等着落山风吹过 你从一座叫我的小镇经过 刚好屋顶的雪化成语飘落 你穿着透明的衣服 给我一个人唱歌 全都是我喜欢的歌 我们去大草原的湖边 等候鸟风回来 等我们都长大了 就剩一个娃娃 他会自己长大远去 我们也各自远去 我给你写信 你不会回信 就这样吧 以前人们在四月开始收获 躺在高高的谷堆上面笑着 ·················· 你不会回信 说好了吧 去大草

转眼间就周日了，这段时间真的有点祸不单行，心累，有点小感冒半个月了，依然不见好转，身体上就是不舒服，然后公司确认薪资的事情很烦，明明说好的工资，莫名其妙就变化了，主要是完全在我不知情的情况下，国企这个系统本来提升就很难，如果起点低就更加没得干了，都是泪。 今天起床之后发现胖子说的好有道理，我只应该拿出一个目标就好，以后不能这样想法太多，人活得太累，容易变得消极，今天起开始准备我的学历提升了，不在考

芯片冲压: 测缝隙0.04mm为标准，压片420片。看了纳兰容若诗集简析:但愿人长久，千里共婵娟，终来得一日，结尾并蹄莲！

今天心情落到了谷底，些许的感冒，完全不想动，心真的好累，体会到一点北漂的感觉了，累，而且没有一丁点的归属感，现在的我真的需要人陪，是该好好休息休息了！

工作整天流程 早班会后进入洁净区首先打开烘箱（调温至80℃），回到碟片点样间清洗手套，酒精擦拭所有桌面以及芯片盘，更换系统液（超声5min），装纯化水200ul至0.2ml是EP管中并置入烘箱加热，配置点样液，分配点样液，系统液更换后开机（开机-初始化-系统液-超声2次-加热水清洗），点样、晾干，盖片，关机（系统液-超声2次-热水清洗），抽真空，冲压，送质检，入库。

点样液配制 领取物料:酵母基因组DNA、15种混合引物、无菌水。 配制前准备:15种混引以及酵母基因组DNA室温溶解后，振荡瞬离，后备用；在黄板以及蓝板上分别摆放15个200ul和1.5ml的EP管，并标好23.56.89.1112.1415.1718.2021.23；并检查移液器1000ul与200ul以及对应枪头是否足够。 点样液配制(一人配一人复核):14种点样液——向15个1.5ml的EP管中加入498ul的引物固定液(琼脂糖水溶液:无菌水=6984:1383)，然后加入按顺序依次加入90ul混引；PC配制——向编号为23的1.5mlEP管内

今天二姐打电话给我，说大妈每天都在家说，我一个人一毕业就来北京，离家那么远，怕我吃不饱，怕我没钱用，怕我被欺负。心里不知道酸，我来北京不算辛苦，但是确实也过得不容易，但是我很淡然，毕竟我们都在成长，成长中接受一些，面对一些，总是好的。所以希望家里的“妈妈”不要为我担心，孩儿已经长大，会照顾自己，会在外面好好的！希望您身体健康，开开心心安度晚年！

来总公司培训非常高兴，环境什么的都不错，就是补贴太少，根本不够用！每天下班走路回来，腿疼的要死！

本吧隶属本人，只用于写自己的回忆，留下自己的故事，不喜勿喷，更不要爆粗口，违者删帖！谢谢合作！