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0医学全科可收SCI 核心期刊先录用后付款代理也可
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0No.1 紫外线消毒的原理是什么? 紫外线根据生物效应不同,可以分为ABC等波段,我们常用的消毒功能主要采用UV-C波段,也就是200-275nm波段紫外线,其中最强的是250-270nm波段。 紫外线通过对微生物,例如细菌、病毒等病原体进行辐射损伤,破坏核酸功能,改变DNA或RNA生物活性,使得微生物失去繁殖能力,从而实现消毒杀菌功能,包括细菌繁殖体、芽孢、分枝杆菌、病毒、真菌、立克次体和支原体等都可以采用紫外线杀灭。 实验室紫外灯种类 热阴极低
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0000000000001. 上样:样品加载: 上样量:细胞:10ug,组织:20ug,标记物上样量:2ul。 2. 电泳:分离胶浓度:常见有10%、9%和6%(大分子量选用浓度较低的胶,小分子量则相反)。浓缩胶浓度:5%。 电泳缓冲液配制:将100ml母液加入900ml蒸馏水,再加入1g SDS。 电泳条件:运行浓缩胶条件为80v,40min;运行分离胶条件为120v,50min。 3. 转膜:电转液:100ml母液+700ml蒸馏水+200ml甲醇(1)将PVDF膜在100%甲醇中浸泡10秒至15秒。 (2)倒入配置好的转印缓冲液于平底托盘中,将01在分子生物学研究中,质粒构建和蛋白质表达是两项基础而关键的技术。然而,在实际操作过程中,小伙伴们可能会遇到各种问题。本文将探讨这些常见问题及其解决办法,以帮助水深火热中的小伙伴提高实验效率和成功率。 质粒构建常见问题及解决办法 怎样选取载体? 载体一般可被划分为克隆载体与表达载体这两种类型。 克隆载体多数属于高拷贝载体,能够把外源基因跟克隆载体的质粒加以连接,导入原核细菌之中,实施大量的复制克隆。其主3分子克隆(基因克隆/DNA重组/载体构建)技术是一种在分子水平上操作的技术,用于将特定的DNA片段从供体生物中分离出来,然后通过体外重组、转化和转导等方法,将其插入到适合的克隆载体中,并将重组克隆载体引入到合适的寄主体内进行复制与扩增。可以应用于蛋白表达、病毒包装、基因治疗、细胞治疗、mRNA疫苗、RNA干扰、细胞功能等研究。 具体操作流程:一、聚合酶链式反应(PCR)DNA聚合酶以单链DNA为模板,借助一小段双链DNA来启动合成,0200000000专业团队:生信分析和画图,包括TCGA,GEO数据挖掘,芯片数据分析,bulk-RNA测序,单细胞转录组下游分析,具体如下: 【分析】 1. 数据整合,表达矩阵处理 2. DEseq2, EsgeR, Limma差异分析 3. GSEA,GO,KEGG富集分析 4. Cibersort,Estimate免疫浸润分析 5. 单细胞数据处理,降维聚类,tsne umap可视化,细胞注释 6. 单细胞差异分析,GSEA富集分析 7. Motif转录因子富集分析 8. AUcell分析 9. Scenic调控网络分析 10. monocle拟时序分析 11. 细胞互作,细胞通讯 12. InferCNV 【画图】 可0专业团队:生信分析和画图,包括TCGA,GEO数据挖掘,芯片数据分析,bulk-RNA测序,单细胞转录组下游分析,具体如下: 【分析】 1. 数据整合,表达矩阵处理 2. DEseq2, EsgeR, Limma差异分析 3. GSEA,GO,KEGG富集分析 4. Cibersort,Estimate免疫浸润分析 5. 单细胞数据处理,降维聚类,tsne umap可视化,细胞注释 6. 单细胞差异分析,GSEA富集分析 7. Motif转录因子富集分析 8. AUcell分析 9. Scenic调控网络分析 10. monocle拟时序分析 11. 细胞互作,细胞通讯 12. InferCNV 【画图】 可0什么是RNA提取 细胞中的RNA可以分为信使RNA、转运RNA和核糖体RNA三大类,不同组织总RNA提取的实质就是将细胞裂解,释放出RNA,并通过不同方式去除蛋白,DNA等杂质,最终获得高纯度RNA产物的过程。 RNA提取的使用目的 通过总RNA提取可获得高纯度及高质量的总RNA,可用于实时荧光定量PCR、Northern blot、microRNA检测、芯片分析, DNA文库构建,基因克隆等实验。RNA用于不同的后续实验,其质量要求不尽相同。 cDNA文库构建要求RNA完整而无酶反应抑制物残留; Northern对RNA完整0000qPCR实验中通常会遇到复孔间重复性差的情况,一般有以下两种: 一、CT值很大,如CT≥30,重复性差属于正常现象。该现象符合泊松分布,即在有效模板量很少的情况下,模板与引物的碰撞存在随机性,直接导致复孔间的CT值差异较大。解决方法为如果融解曲线没有杂峰,无模板阴性对照同目的基因的△CT值为3 or 5以上,那CT值为准确的,可多设置几个复孔,选择重复性好的CT值参与计算。 二、CT<30,重复性较差。这种情况一般同操作有关。可从以下几0提问00蛋白质含量可从它们的物理化学性质,如折射率、比重,紫外吸收、染色等测定而得知;或用化学方法,如定氮、双缩脲反应、 folin-酚试剂反应、BCA法等方法来测定。 1 比色法 蛋白定量常使用的方法是比色法,通常用于总蛋白的定量分析。根据蛋白和比色试剂的结合,可以将比色法分为:蛋白-染料结合法和蛋白-铜螯合化学试剂法。前者对应的典型蛋白定量比色法是考马斯亮蓝G250染料结合法,后者则包括双缩脲法,Lowry法,二喹啉甲酸(BCA)法。 1、Brad00在分子生物学研究中,酶切是一项常用的实验技术,用于切割DNA或RNA分子。然而,有时候我们会遇到酶切不完全的情况,即酶不能完全切割目标分子的现象。这可能会给我们的实验带来一些困扰,影响实验结果的准确性和可靠性。核酸内切酶 酶切不完全的原因有很多,下面我们将介绍一些可能的原因以及解决方法。 1 核酸内切酶酶切不完全的原因: 1. 质量不佳的DNA/RNA样本: 酶切的效果受到DNA/RNA样本的质量影响,如果样本受到污染或降解,酶切可能1医学核心行业痛点:1.价格贵2.周期慢3.成功率低 鱼和熊掌不可兼得,我认为的最优方案应该是:成功率保障的是前提条件下,客户需明确价格与周期的优先级。 价格优先级高,就选直投正常稿,价格低。(这个是我这边的模式) 周期优先级高,就选关系加急稿,周期快。0免疫组织化学技术:检测组织原位表达的肽类、激素、神经递质、细胞因子、受体、表面抗原等抗原性物质。 免疫 immuno- 抗原抗体的免疫反应 组织 histo- 检测组织中表达的抗原性分子 化学 chemistry 酶促/荧光可见反应 (一)组织和细胞标本的准备 1.组织标本的取材 —— 取材新鲜,固定及时,形态完好。 2. 细胞标本的准备 (1)活体细胞标本: 印片法、穿刺吸取法、沉淀法 (2)培养细胞标本: ① 细胞涂片: 将细胞制成悬液(10^6)涂在 涂有切片粘合